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上海金相镶嵌机悬液培养可分两类:单层上海金相镶嵌机培养和悬浮培养 |
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上海金相镶嵌机悬液培养可分为两类:单层上海金相镶嵌机培养和悬浮培养 上海金相镶嵌机计数的方法:首先用0.1克分子量的枸橼酸溶液,使上海金相镶嵌机核与上海金相镶嵌机质分离,然后再用O.1%结晶紫溶液,使上海金相镶嵌机核染色,将已染色的上海金相镶嵌机用生理盐水作定量稀释,并注入上海金相镶嵌机计数器进行计数。也可采用不染色直接注入上海金相镶嵌机计数器中计数。为了增加计数的准确性,计数前必须搅动悬液菠上海金相镶嵌机分布均匀;在悬液注入计数器时,不要用力太大,只须从吸管中轻轻地挤出一滴悬液,依靠毛潮管的吸力,使悬液流入计数器。计数时,在低倍金相试样磨抛机下数出四焦姻天诲中的上海金相镶嵌机数,仅计算有胞浆和胞核的完整上海金相镶嵌机数,根据以下方程式,算出每毫升悬液中的上海金相镶嵌机数 如果稀释上海金相镶嵌机的悬液并非l毫升,只须将上海金相镶嵌机数/毫升再乘以悬液毫升数,即得悬液中的上海金相镶嵌机总数。 由于染色的上海金相镶嵌机核看起来比较清楚,而且可以区别出正常健康的上海金相镶嵌机核和早期坏死阶段的上海金相镶嵌机核,为了计数的准确性,还是采用染色计数的方法为好。(近代电子上海金相镶嵌机计数器已逐步代替了上海金相镶嵌机计数器的计数方法)。 悬液培养法 上海金相镶嵌机悬液培养法可分为两类:一类是单层上海金相镶嵌机培养,或称定量培养。上海金相镶嵌机在这种培养里虽然是用悬液状态接种于培养瓶内,但接种后上海金相镶嵌机立即沉入瓶底,固着干玻璃底面进行增殖。因此,这种培养实际上还是一种静止状态的培养。另一类是悬浮培养,它是一种活动状态的培养,即通过一种特殊的装置,使悬液不停地滚动,上海金相镶嵌机在培养液中始终保持悬浮的状态。这种培养法可使上海金相镶嵌机大量的繁殖,获得大量的上海金相镶嵌机。今仅介绍单层上海金相镶嵌机培养法。 单层上海金相镶嵌机培养:单层上海金相镶嵌机培养,多用于不同实验条件下上海金相镶嵌机的定量测定和病毒的研究上。 单层上海金相镶嵌机培养,其上海金相镶嵌机的来源有两种,一种可先通过母培养,即先经过组织块的培养而获得上海金相镶嵌机悬液,再进行单层上海金相镶嵌机培养。另一种来源是利用胰蛋白酶或其他酶的消化作用,直接把新鲜组织的上海金相镶嵌机间质破坏,使上海金相镶嵌机分散成游离上海金相镶嵌机,再制成上海金相镶嵌机悬液进行单层上海金相镶嵌机培养。一般经过母培养的方法比较容易成功,而用组织直接消化的方法是比较难以成功的。今以免肾为侧,说明单层细施培养的过程。
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