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酶在生物代谢中的作用及酶分子构象的变化 |
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酶在生物代谢中的作用及酶分子构象的变化酶动力学 酶提纯后,首先要用动力学的方法来研究酶促反应的速度以及影响此速度的各种因素。用以进——步探讨酶的结构与功能的关系,酶促反应的机理,酶在生物代谢中的作用,和酶如何调控药物的生理作用等。酶动力学的数据 酶促反应的速度系以特定时间内产物生成量或底物减少量来计算。方法很多,视酶、产物和底物的性质而定。一般要在酶促反应开始后间隔适当时间从反应溶液中取样少许,将酶的活性破坏,使反应停止。然后再用沉淀法,比色法、吸收光谱法、或放射性同位素法来测定产物的生成量或底物的减少量。其中以吸收光谱法***为方便,因方假若产物或底物本身在紫外或可见光谱区即有***大的吸收值时,即不必再将产物或底物从反应溶液中分离出来,就可以测出它们变更的量,并且可以连续地绘出吸收曲线。有时反应物本身的吸收光谱不显著,尚可以设法利用一个并行相辅的反应。在这个反应中光谱吸收的变化大,于是间接便测出原来反应的速度,得到各种酶动力学的数据。 酶分子的失活和复活都伴随有构象的变化。但由实验上的验证,失活的速度大大地快过构象变化的速度,而复活的速度却慢过构象恢复的速度。很可能是若使用变性剂使酶失活时,在酶分子一分解为亚基时,就已失去了活性。也可能是在活性部位中参与催化反应的各个基团间的完整空间关系一旦发生变化,就可以引起酶活性的丧失。但是我们还要认清,不是每个酶分子在失活时,其构象变化的情形和速度都是一佯的。也不是三维的构象展开多少,酶活性即失去多少。因为酶的失活和每个个别分子的环境及遭遇都有关,不是每个酶分子都会和变性剂分子即时遭遇的。
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