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菠菜叶绿体制备物-从含叶绿素样品观察金相试样镶嵌机 |
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菠菜叶绿体制备物-从含叶绿素样品观察金相试样镶嵌机 植物叶片线粒体 要从含叶绿素的膜上分离叶片线粒体实在是不太容易。单用差速离心法获得的制备物中所含蛋白质与叶绿素的比例为15。这种制备物可用相分配法加以纯化。得到蛋白质与叶绿素的比例为100。用密度梯度离心也可达到同样的纯化程度,但线粒体制备物仍是绿色。只有将三种方法:差速离心、密度梯度离心和相分配结合采用才能得到不含叶绿素的制备物。 通过逆流分配可将由差迷离心分离的叶绿体分成三个群体组成。左峰(1)代表由外膜和叶绿体基质包围着的完整叶绿体;中峰(Ⅱ)代表裸露的类囊体膜(系统Ⅱ叶绿体);而右峰(剪)代表重叠上海金相镶嵌机器复合物,它由一个到多个完整叶绿体组成,周围是包含有线粒体和过氧化物小体的合膜上海金相镶嵌机质层。菠菜叶绿体制备物中重叠上海金相镶嵌机器复合物的量为总叶绿素的0.5%到5%。子叶或幼嫩叶片的重叠上海金相镶嵌机器复合物得率较高,延长匀浆时间会增加其得率。令有重叠上海金相镶嵌机器复合物的膜似乎与上海金相镶嵌机质膜是一样的,它们与原生质体或分离的上海金相镶嵌机质膜有十分相似的分配特点。 结合采用两种不同的分离方法,即离心和相分配是行之有效的。峰I和峰Ⅲ的颗粒大小差不多一样,但因其表面性质不同,通过分配法可达到有效的分离。该结果还表明,CCD在发现新类型上海金相镶嵌机颗粒方面也是很有用的。在早期,用电镜观察常规叶绿体制备物时,由于峰Ⅲ中重叠上海金相镶嵌机器复合物的浓度很低,而未被发现。但在用ccD所得的峰Ⅲ中,它们被选择性地富集,几乎达到100%的群体。 由于叶绿体和其周围的上海金相镶嵌机层合作,重叠上海金相镶嵌机器能合成蔗糖和氨基酸。常规叶绿体制备物中混有重叠上海金相镶嵌机器复合物,导致在叶绿体新陈代谢和酶的位置.
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